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人促胰島生長素(betatrophin)elisa試劑盒

簡要描述:人促胰島生長素(betatrophin)elisa試劑盒本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

  • 產(chǎn)品型號:BS-9940
  • 產(chǎn)       地:天津市
  • 更新時(shí)間:2023-05-22
  • 訪  問  量:1375
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌產(chǎn)地國產(chǎn)
級別其他規(guī)格48T/96T

  人促胰島生長素(betatrophin)elisa試劑盒

  本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

  本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人促胰島生長素(betatrophin)的含量。

  有效期:6個(gè)月

  保存條件:2-8℃

  試劑盒組成:

  備注:

  1.(96T/48T)打開包裝后請及時(shí)檢查所有物品是否齊全。

  2.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:800、400、200、100、50、25 ng/L

  3.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用ye將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

  檢測前準(zhǔn)備工作:

  1.請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

  2.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液??蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃

  3.20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

  實(shí)驗(yàn)原理:

  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人胰島生長素(betatrophin)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島生長素(betatrophin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

  實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材:

  1.酶標(biāo)儀(450nm)

  2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

  3.37℃恒溫箱

  4.蒸餾水或去離子水

  人促胰島生長素(betatrophin)ELISA試劑盒樣本處理及要求:

  1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織jian碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

  4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  5.其它生物標(biāo)本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測。

  6.樣品外觀:樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。

  7.樣品保存:樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃,若不能及時(shí)檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測),或-80℃(6個(gè)月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融,標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

  注意事項(xiàng):

  1.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

  2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

  3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

  4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

  5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

  6.在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

  7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

  8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

  9.不能使用過期產(chǎn)品。

  10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

  操作步驟:

  1.從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。

  3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

  4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算:

  繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

  人促胰島生長素(betatrophin)ELISA試劑盒性能:

  1.檢測范圍:25 ng/L – 800 ng/L。

  2.靈敏度:檢測濃度小于1.0 ng/L。

  3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

  4.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

  技術(shù)小提示:

  1.當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí),盡量避免起沫。

  2.為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

  3.每次孵育時(shí),請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  4.混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍(lán)色。

  5.終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請充分混合。

  人促胰島生長素(betatrophin)elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。



 


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