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知識(shí)講解:培養(yǎng)基保存條件及相關(guān)滅菌的有關(guān)問(wèn)題

更新時(shí)間:2023-09-07    點(diǎn)擊次數(shù):5006

  知識(shí)講解:培養(yǎng)基保存條件及相關(guān)滅菌的有關(guān)問(wèn)題
 

  培養(yǎng)基的保存條件:

  1.建議按照產(chǎn)品說(shuō)明書的要求放置在推薦的儲(chǔ)存條件。

  2.干粉培養(yǎng)基:即使能一定程度上抵御光和濕度,但是建議客戶還是存放在干燥避光的環(huán)境。干粉的最佳儲(chǔ)存溫度是15-25 °C (59-77 °F)。長(zhǎng)時(shí)間存放導(dǎo)致的pH值變化可能通過(guò)酸堿調(diào)節(jié)。干粉培養(yǎng)基是容易吸濕的,所以瓶蓋應(yīng)該盡量保持蓋緊。吸水后的干粉可能導(dǎo)致pH變化并且結(jié)塊。明顯結(jié)塊且不易用藥匙壓碎的干粉培養(yǎng)基不建議繼續(xù)使用,因?yàn)閮?nèi)部化學(xué)成分可能發(fā)生變化。

  3. 對(duì)于配好的培養(yǎng)基,溫度是4-12°C且避光保存。裝在密閉容器或密封袋中避免污染和水分流失。含有血、蛋黃等高營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基應(yīng)該放在2-8°C 存放。放入密閉容器前的平板需要保持干燥并且溫度不能太高。否則在密閉容器中產(chǎn)生太多凝結(jié)水會(huì)導(dǎo)致污染。失水超過(guò)15%的瓊脂可能影響微生物生長(zhǎng),尤其可能影響革蘭氏陰性菌。液體培養(yǎng)基過(guò)度失水也會(huì)導(dǎo)致某些成分的沉淀和結(jié)晶。

  培養(yǎng)基滅菌問(wèn)題:

  1.培養(yǎng)基的配制是否都需要高壓滅菌,多長(zhǎng)時(shí)間比較合適?

  培養(yǎng)基配制方法,建議首先參考產(chǎn)品說(shuō)明書指示的配制、滅菌操作的指示,進(jìn)行操作。

  含有瓊脂的干粉培養(yǎng)基需要加熱煮沸,因?yàn)榄傊娜茳c(diǎn)在96°C左右。需要保證各成分充分混勻。熱水溶解無(wú)法代替加熱煮沸。培養(yǎng)基未煮沸狀態(tài)為渾濁,隨著加熱煮沸,顆粒溶解,培養(yǎng)基會(huì)變澄清,且不含有塊狀。一般培養(yǎng)基沸騰后,觀察到澄清,且沒(méi)有明顯的不溶塊狀或膠狀物即可。

  有些培養(yǎng)基含有溫度敏感的成分,不能高壓滅菌,因此在操作上需要格外注意,需要參考說(shuō)明書的具體操作。

  2.已經(jīng)輻照滅菌的培養(yǎng)基還能高溫高壓再滅菌嗎?

  已經(jīng)輻照滅菌的培養(yǎng)基,通常不建議再高溫高壓滅菌或其他加熱手段。如果無(wú)菌模擬灌裝實(shí)驗(yàn)需要模擬過(guò)濾滅菌以及高溫高壓蒸汽滅菌的兩個(gè)過(guò)程,通常滅菌后的培養(yǎng)基仍然能夠提供足夠營(yíng)養(yǎng)以保證微生物生長(zhǎng),但是強(qiáng)烈建議使用者在模擬過(guò)程中加測(cè)微生物促生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。

  3.干粉或顆粒培養(yǎng)基使用說(shuō)明書中121℃滅菌15分鐘是指滅菌的過(guò)程時(shí)長(zhǎng)嗎?

  培養(yǎng)基說(shuō)明書中121℃滅菌15分鐘是指高壓蒸汽滅菌法,在溫度達(dá)到121℃,持續(xù)滅菌15min。建議首先確認(rèn)滅菌設(shè)備的原理為高壓蒸汽滅菌法,而且滅菌過(guò)程是符合相關(guān)滅菌效果驗(yàn)證的,以確保培養(yǎng)基得到有效滅菌。

  備注:以上信息僅供參考,具體信息說(shuō)明及操作以廠家說(shuō)明書為準(zhǔn)。

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