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人Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒操作方法

更新時間:2021-11-02    點擊次數(shù):1344

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  人Ⅰ型膠原試劑盒操作注意事項:

  1、試劑應按標簽說明書儲存,使用恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

  2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。

  3、不同批號的試劑不要混用。

  4、人Ⅰ型膠原試劑盒保質(zhì)使用。

  5、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

  6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。

  7、實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

  人Ⅰ型膠原試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

  1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

  2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  3、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘。

  4、取上清液保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。

  注意:盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

  人Ⅰ型膠原試劑盒性能:

  1、靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.1 ng/mL。

  2、特異性:不與其它細胞因子反應。

  3、重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

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